森岡 弘志 (Hiroshi MORIOKA)

●役職:教授

●メールアドレス:morioka*gpo.kumamoto-u.ac.jp(*を@に替えてください)

●研究分野:分析化学・タンパク質工学・生化学・分子生物学

●研究テーマ:

1.創薬・病態解析・治療法に有効な抗体の分子工学研究

2.DNA複製・修復関連タンパク質の構造と機能の解析

3.生体内低分子化合物を識別するタンパク質分子素子の開発と機能評価

 

 

●出身地・略歴:

大阪府出身

1984年 大阪大学薬学部卒業

1989年 大阪大学大学院薬学研究科博士後期課程修了

薬学博士

〔学位論文:蛋白質工学によるリボヌクレアーゼT1の基質認識機構の研究〕

1989-1991年 マサチューセッツ工科大学生物学部研究員、「血管内皮細胞表面に存在する血液凝固反応に関与する調節因子、トロンボモジュリンの遺伝子発現調節機構」の研究に従事

1991-2007年 北海道大学大学院薬学研究科助手、助教授、「紫外線損傷DNAに特異的な抗体の抗原認識機構の解明」、「ヒト増殖細胞核抗原の構造と機能の研究」、「ドメイン工学による食細胞NADPHオキシダーゼの機能の解析」、「グリケーション後期反応生成物(AGE)に特異的な小型抗体の分子工学的手法による作製,ならびに,抗原構造解析」に従事

2007年より、現職

●趣味:

サッカー観戦(札幌のプロサッカーチームを応援しています。最近、熊本のチームも気になってきました)

陸上息子の追っかけ

●社会活動:

九州薬科学研究教育連合主催の高校教養講座講師等

宮崎県の県立高等学校への出前授業

●所属学会:

・日本薬学会

  日本薬学会代議員(H16, H17, H22, H23)

  日本薬学会九州支部幹事(H21〜H23)

  日本薬学会北海道支部庶務幹事(H14, H16)

  日本薬学会北海道支部幹事(H15)

・日本生化学会

  日本生化学会九州支部評議員(H20〜)

・日本分子生物学会

  北海道分子生物学研究会庶務幹事(H8, 9)

  北海道分子生物学研究会幹事(H11〜H18)

・日本蛋白質科学会

・日本メイラード学会

・フロンティア生命科学研究会

●担当授業

(大学院)生命分析化学特論I,生命分析化学特論II,分析化学実習

(学部専門科目)分析化学I,分析化学II,生命分析化学演習,創薬分析化学実習,物理系薬学実習

(教養教育科目)英語D-2、学際科目

 

●研究業績(著書・論文等)

I.原著論文

1. Doi, T., Morioka, H., Matsugi, J., Ohtsuka, E., and Ikehara, M*.: Modification of the amino acid acceptor stem of E.coli tRNAMet by ligation of chemically synthesized ribooligonucleotides. FEBS Lett. 190, 125-128 (1985).

2. Ohtsuka, E., Matsugi, J., Yamane, A., Morioka, H., and Ikehara, M*.: Studies on transfer ribonucleic acids (tRNA) and related compounds, XLIX. Solid-phase synthesis of nonadecaribonucleotide corresponding to the 5'-half of the formylmethionine tRNA deficient in D-loop and stem region. Chem. Pharm. Bull. 33, 4152-4159 (1985).

3. Ikehara, M*., Ohtsuka, E., Tokunaga, T., Nishikawa, S., Uesugi, S., Tanaka, T., Aoyama, Y., Kikyodani, S., Fujimoto, K., Yanase, K., Fuchimura, K., and Morioka, H.: Inquiries into the structure-function relationship of ribonuclease T1 using chemically synthesized coding sequences. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83, 4695-4699 (1986).

4. Nishikawa, S*., Morioka, H., Fuchimura, K., Tanaka, T., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Modification of Glu 58, an amino acid of the active center of ribonuclease T1, to Gln and Asp. Biochem. Biophys. Res. Comm. 138, 789-794 (1986).

5. Ikehara, M*., Nishikawa, S., Morioka, H., Kim, H., J., Fuchimura, K., Kimura, T., Adiwinata, J., Tanaka, T., Ohtsuka, and E., Uesugi, S.: Mechanism of hydrolysis of phosphodiesters with ribonuclease T1. Pure & Appl. Chem. 59, 965-968 (1987).

6. Nishikawa, S*., Morioka, H., Kim, H., J., Tanaka, T., Uesugi, S., Hakoshima, T., Tomita, K., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Two histidine residues are essential for ribonuclease T1 activity as is the case for ribonuclease A. Biochemistry 26, 8620-8624 (1987).

7. Nishikawa, S*., Kimura, T., Morioka, H., Uesugi, S., Hakoshima, T., Tomita, K., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Glu 46 of ribonuclease T1 is an essential residue for the recognition of guanine base. Biochem. Biophys. Res. Comm. 150, 68-74 (1987).

8. Nishikawa, S*., Morioka, H., Kimura, T., Ueda, Y., Tanaka, T., Uesugi, S., Hakoshima, T., Tomita, K., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Increase in nucleolytic activity of ribonuclease T1 by substitution of tryptophan 45 for tyrosine 45. Eur. J. Biochem. 173, 389-394 (1988).

9. Hakoshima, T*., Toda, S., Sugio, S., Tomita, K., Nishikawa, S., Morioka, H., Fuchimura, K., Kimura, T., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M*.: Conformational properties of the guanine-binding site of ribonuclease T1 inferred from the X-ray structure and protein engineering. Protein Eng. 2, 55-61 (1988).

10. Nishikawa, S*., Adiwinata, J., Morioka, H., Fujimura, T., Tanaka, T., Uesugi, S., Hakoshima, T., Tomita, K., Nakagawa, S., and Ikehara, M.: A thermoresistant mutant of ribonuclease T1 having three disulfide bonds. Protein Eng. 3, 443-448 (1990).

11. Fujimura, T., Tanaka, T., Ohara, K., Morioka, H., Uesugi, S*., Ikehara, M., and Nishikawa, S.: Secretion of recombinant ribonuclease T1 into the periplasmic space of Escherichia coli with the aid of the signal peptide of alkaline phosphatase. FEBS Lett. 265, 71-74 (1990).

12. Hakoshima, T*., Oka, K., Toda, S., Tanaka, M., Gohda, K., Higo, T., Itoh, T., Minami, H., Tomita, K., Nishikawa, S., Morioka, H., Imura, J., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Crystallographic characterization of wild-type and mutant ribonuclease T1 complexes with several ribonucleotides. J. Biochem. 108, 695-698 (1990).

13. Hakoshima, T*., Itoh, T., Tomita, K., Nishikawa, S., Morioka, H., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Crystallization and preliminary X-ray investigation of non-specific complexes of a mutant ribonuclease T1 (Y45W) with 2'AMP and 2'UMP. J. Mol. Biol. 216, 497-499 (1990).

14. Ueda, H., Iyo, H., Doi, M., Inoue, M., Ishida, T*., Morioka, H., Tanaka, T., Nishikawa, S., and Uesugi, S.: Combination of Trp and Glu residues for recognition of mRNA cap structure. Analysis of m7G base recognition site of human cap binding protein (IF-4E) by site-directed mutagenesis. FEBS Lett. 280, 207-210 (1991).

15. Ueda, H., Maruyama, H., Doi, M., Inoue, M., Ishida, T*., Morioka, H., Tanaka, T., Nishikawa, S., and Uesugi, S.: Expression of a synthetic gene for human cap binding protein (human IF-4E) in Escherichia coli and fluorescence studies on interaction with mRNA cap structure analogues. J. Biochem. 109, 882-889 (1991).

16. Hakoshima, T*., Itoh, T., Gohda, K., Tomita, K., Uesugi, S., Nishikawa, S., Morioka, H., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Non-cognizable ribonucleotide, 2'AMP, binds to a mutant ribonuclease T1 (Y45W) at a new base-binding site but not at the guanine-recognition site. FEBS Lett. 290, 216-220 (1991).

17. Hakoshima, T*., Tanaka, M., Itoh, T., Tomita, K., Amisaki, T., Nishikawa, S., Morioka, H., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Hydrophobic effects on protein/nucleic acid interaction: enhancement of substrate binding by mutating tyrosine 45 to tryptophan in ribonuclease T1. Protein Eng. 4, 793-799 (1991).

18. Itoh, T., Tomita, K., Hakoshima, T*. , Hiroaki, H., Uesugi, S., Nishikawa, S., Amisaki, T., Morioka, H., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Conformation of 2'GMP bound to a mutant ribonuclease T1 (Y45W) determined by X-ray diffraction and NMR methods. J. Biochem. 110, 677-680 (1991).

19. Hakoshima, T*., Itoh, T., Tomita, K., Gohda, K., Nishikawa, S., Morioka, H., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Three-dimensional structure of a mutant ribonuclease T1 (Y45W) complexed with non-cognizable ribonucleotide, 2'AMP, and its comparison with a specific complex with 2'GMP. J. Mol. Biol. 223, 1013-1028 (1992).

20. Yu, K., Morioka, H., Fritze, L. M. S., Beeler, D. L., Jackman, R. W., and Rosenberg, R. D*.: Transcriptional regulation of the thrombomodulin gene. J. Biol. Chem. 267, 23237-23247 (1992).

21. Gohda, K., Itoh, T., Hiramatsu, Y., Tomita, K., Nishikawa, S., Uesugi, S., Morioka, H., Ohtsuka, E., Ikehara, M., and Hakoshima, T*.: Crystal structure of RNase T1 (Y45W) complexed with 3'AMP and GflpA. J. Biochem. 114, 842-848 (1993).

22. Iwai, S., Maeda, M., Shimada, Y., Hori, N., Murata, T., Morioka, H., and Ohtsuka, E*.: Endonuclease V from bacteriophage T4 interacts with its substrate in the minor groove. Biochemistry 33, 5581-5588 (1994).

23. Nakae, J., Morioka, H., Ohtsuka, E., and Fujieda, K*.: Replacements of leucine 87 in human insulin receptor alter affinity for insulin. J. Biol. Chem. 270, 22017-22022 (1995).

24. Fukuda, K., Morioka, H., Imajou, S., Ikeda, S., Ohtsuka, E., and Tsurimoto, T*.: Structure-function relationship of the eukaryotic DNA replication factor, Proliferating Cell Nuclear Antigen. J. Biol. Chem. 270, 22527-22534 (1995).

25. Shimizu, M., Morioka, H., Inoue, H., and Ohtsuka, E*.: Triplex-mediated cleavage of DNA by 1,10-phenanthroline-linked 2'-O-methyl RNA. FEBS Lett. 384, 207-210 (1996).

26. Todo, T*., Kim, S-T., Hitomi, K., Otoshi, E., Inui, T., Morioka, H., Kobayashi, H., Ohtsuka, E., Toh, H., and Ikenaga, M.: Flavin adenine dinucleotide as a choromophore of the Xenopus (6-4)photolyase. Nucleic Acids Res. 25, 764-768 (1997).

27. Kimura, S., Kai, M., Kobayashi, H., Suzuki, A., Morioka, H., Ohtsuka, E., and Sakaguchi, K*.: A Structure-specific endonuclease from cauliflower (Brassica oleracea var. botrytis) inflorescence. Nucleic Acids Res. 25, 4970-4976 (1997).

28. Kobayashi, H., Morioka, H., Torizawa, T., Kato, K., Shimada, I., Nikaido, O., and Ohtsuka E*.: Specificities and rates of binding of anti-(6-4) photoproduct antibody fragments to synthetic thymine photoproducts. J. Biochem. 123, 182-188 (1998).

29. Kai, M., Todo, T., Wada, M., Ryo, H., Masutani, C., Kobayashi, H., Morioka, H., Ohtsuka, E., Hanaoka, F., and Sakaguchi, K*.: A new drosophila ultraviolet light-damaged DNA recognition endonuclease that selectively nicks a (6-4) photoproduct site. Biochim. Biophys. Acta 1397, 180-188 (1998).

30. Morioka, H., Miura, H., Kobayashi, H., Koizumi, T., Fujii, K., Asano, K., Matsunaga, T., Nikaido, O., Stewart, J. D*., and Ohtsuka, E*.: Antibodies specific for (6-4) DNA photoproducts: Cloning, antibody modeling and construction of a single-chain Fv derivative. Biochim. Biophys. Acta 1385, 17-32 (1998).

31. Torizawa, T., Kato, K., Kimura, Y., Asada, T., Kobayashi, H., Komatsu, Y., Morioka, H., Nikaido, O., Ohtsuka, E., and Shimada, I*.: 31P NMR study of the interactions between oligodeoxynucleotides containing (6-4) photoproduct and Fab fragments of monoclonal antibodies specific for (6-4) photoproduct. FEBS Lett. 429, 157-161, (1998).

32. Oku, T., Ikeda, S., Sasaki, H., Fukuda, K., Morioka, H., Ohtsuka, E., Yoshikawa, H., and Tsurimoto, T*.: Functional sites of human PCNA which interact with p21 (Cip1/Waf1), DNA polymerase  and replication factor C. Genes to Cells 3, 357-369 (1998).

33. Kobayashi, T., Takeuchi, S., Saijo, M., Nakatsu, Y., Morioka, H., Otsuka, E., Wakasugi, M., Nikaido, O., and Tanaka, K*.: Mutational analysis of a function of xeroderma pigmentosum group A (XPA) protein in strand specific DNA repair. Nucleic Acids Res. 26, 4662-4668 (1998).

34. Kobayashi, H., Morioka, H., Nikaido, O., Stewart, J. D*., and Ohtsuka, E*.: The role of surface lysines in pyrimidine (6-4) pyrimidone photoproduct binding by a high-affinity antibody. Protein Eng. 11, 1089-1092 (1998).

35. Kobayashi, H., Morioka, H., Tobisawa, K., Torizawa, T., Kato, K., Shimada, I., Nikaido, O., Stewart, J. D*., and Ohtsuka, E*.: Probing the interaction between a high-affinity single-chain Fv and pyrimidine (6-4) pyrimidone photodimer by site-directed mutagenesis. Biochemistry 38, 532-539 (1998).

36. Kobayashi, H., Sato, K., Komatsu, Y., Morioka, H., Stewart, J. D., Tsurimoto, T., and Ohtsuka, E*.: Effects of a high-affinity antibody fragment on DNA polymerase reactions near a (6-4) photoproduct site. Photochem. Photobiol. 69, 226-230 (1999).

37. Ohtsuka, E*., Kobayashi, H., Morioka, H., Sato, K., Komatsu, Y., Nikaido, O., Satow, Y., and Shimada, I.: Interactions of high affinity anti (6-4) photoproduct antibody fragments with damaged DNA. Nucleosides & Nucleotides 18, 1321-1322 (1999).

38. Torizawa, T., Kato, K., Kato, J., Kobayashi, H., Komatsu, Y., Morioka, H., Nikaido, O., Ohtsuka, E., and Shimada, I*.: Conformational multiplicity of the antibody combining site of a monoclonal antibody specific for a (6-4) photoproduct. J. Mol. Biol. 290, 731-740 (1999).

39. Morioka, H*., Kobayashi, H., Kurihara, M., Kato, J., Komatsu, Y., Sato, K., Nobuoka, K., Kato, K., Torizawa, T., Shimada, I., Satow, Y., Stewart, J. D., Matsunaga, T., Nikaido, O., and Ohtsuka, E.: Analysis of molecular recognition of antibodies specific for UV-damaged DNA. Photomed. Photobiol. 21, 7-8 (1999).

40. Kobayashi, H., Kato, J., Morioka, H., Stewart, J. D*., and Ohtsuka, E*.: Tryptophan H33 plays an important role in pyrimidine (6-4) pyrimidone photoproduct binding by a high-affinity antibody. Protein Eng. 12, 879-884 (1999).

41. Torizawa, T., Yamamoto, N., Suzuki, T., Nobuoka, K., Komatsu, Y., Morioka, H., Nikaido, O., Ohtsuka, E., Kato, K., and Shimada, I*.: DNA binding mode of the Fab fragment of a monoclonal antibody specific for cyclobutane pyrimidine dimer. Nucleic Acids Res. 28, 944-951 (2000).

42. Ling, F., Morioka, H., Ohtsuka, E., and Shibata, T*.: A role for MHR1, a gene required for mitochondrial genetic recombination, in the repair of damage spontaneously. Nucleic Acids Res. 28, 4956-4963 (2000).

43. Wakasugi, M., Shimizu, M., Morioka, H., Linn, S., Nikaido, O., and Matsunaga, T*.: Damaged DNA-binding protein DDB stimulates the excision of cyclobutane pyrimidine dimers in vitro in concert with XPA and replication protein A. J. Biol. Chem. 276, 15434-15440 (2001).

44. Wakasugi, M., Kawashima, A., Morioka, H., Linn, S., Sancar, A., Mori, T., Nikaido, O., and Matsunaga, T*.: DDB accumulates at DNA damage sites immediately after UV irradiation and directly stimulates nucleotide excision repair. J. Biol. Chem. 277, 1637-1640 (2002).

45. Kobayashi H., Komatsu Y., Morioka, H., and Ohtsuka E*.: DNA binding mode of antibody fragments specific for TT photo-dimers. Phosphorus Sulfur and Silicon 177, 1553-1556 (2002).

46. Nakanishi A., Shum D., Morioka, H., Otsuka E., and Kasamatsu H*.: Interaction of the Vp3 nuclear localization signal with the importin 2/ heterodimer directs nuclear entry of infecting simian virus 40. J. Virol. 76, 9368-9377 (2002).

47. Iida T., Suetake I., Tajima S., Morioka, H., Ohta S., Obuse C., and Tsurimoto T*.: PCNA clamp facilitates action of DNA cytosine methyltransferase 1 on hemimethylated DNA. Genes to Cells 7, 997-1007 (2002).

48. Sakurai S., Kitano K., Okada K., Hamada K., Morioka, H., and Hakoshima T*.: Preparation and crystallization of human flap endonuclease FEN-1 in complex with proliferating-cell nuclear antigen, PCNA. Acta Cryst. D59, 933-935 (2003).

49. Kurosaki, Y., Abe, H*., Morioka, H., Hirayama, J., Ikebuchi, K., Kamo, N., Nikaido, O., Azuma, H., and Ikeda, H.: Pyrimidine dimer formation and oxidative damage in M13 bacteriophage inactivation by ultraviolet C irradiation. Photochem. Photobiol. 78, 349-354 (2003).

50. Suzuki N., Ichikawa N., Kasai, S., Yamada M., Nishi N., Morioka, H., Yamashita H., Kitagawa Y., Utani A., Hoffman M.P., and Nomizu M*.: Syndecan binding sites in the laminin α1 chain G domain. Biochemistry 42, 12625-12633 (2003).

51. Oyama, M., Wakasugi, M., Hama, T., Hashidume, H., Iwakami, Y., Imai, R., Hoshino, S., Morioka, H., Ishigaki, Y., Nikaido O., and Matsunaga, T*.: Human NTH1 physically interacts with p53 and proliferating cell nuclear antigen. Biochem. Biophys. Res. Comm. 321, 183-191 (2004).

52. Takeuchi, R., Oshige, M., Uchida, M., Ishikawa, G., Takata, K., Shimanouchi, K., Kanai, Y., Ruike, T., Morioka, H., Sakaguchi, K*.: Purification of Drosophila DNA polymerase zeta by REV1 protein-affinity chromatography. Biochem. J. 382, 535-543 (2004).

53. Sakurai, S., Kitano, K., Yamaguchi, H., Okada, K., Hamada, K., Fukuda, K., Uchida, M., Ohtsuka, E., Morioka, H*., and Hakoshima, T*.: Structural basis for recruitment of flap endonuclease 1 to PCNA. EMBO J. 24, 683-693 (2005).

54. Yoshida, S., Ogura, K., Yokochi, M., Yuzawa, S., Horiuchi, M., Morioka, H., Sumimoto, H., and Inagaki, F*.: 1H, 13C and 15N resonance assignments of the backbone and methyl groups of the 24 kDa tetratricopeptide repeat domain in p67phox. J Biomol. NMR 32, 176 (2005).

55. Morioka, H*., Kurihara, M., Kobayashi, H., Satou, K., Komatsu, Y., Uchida, M., Ohtsuka, E., Torizawa, T., Kato, K., Shimada, I., Matsunaga, T., and Nikaido, O.: DNA-binding properties of the antibody specific for the Dewar photoproduct of thymidylyl-(3’-5’)-thymidine. Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids 25, 667-679 (2006).

56. Yamamoto, A., Horiuchi, T., Mori, T., Teranishi, M., Hidema, J., Morioka, H., Kumagai, T., and Yamamoto, K*.: Biochemical and biological properties of DNA photolyases derived from ultraviolet-sensitive rice cultivars. Genes Genet. Syst. 82, 311-319 (2007).

57. Sakurai, S., Kitano, K., Morioka, H., and Hakoshima, T*.: Crystallization and preliminary crystallographic analysis of the catalytic domain of human flap endonuclease 1 in complex with a nicked DNA product: use of a DPCS kit for efficient protein-DNA complex crystallization. Acta Crystallogr. Sect. F Struct. Biol. Cryst. Commun. 64(Pt 1), 39-43 (2008).

58. Yamamoto, A., Tanbir, N., Horiuchi T., Teranishi, M., Hidema, J., Morioka, H., and Yamamoto, K*.: Temperature-sensitive photoreactivation of cyclobutane thymine dimer in soybean. J. Radiat. Res. 49, 189-196 (2008).

59. Teranishi, M., Nakamura, K., Morioka, H., Yamamoto, K., and Hidema, J*.: The native cyclobutane pyrimidine dimer photolyase of rice is phosphorylated. Plant Physiology 146, 1941-1951 (2008).

60. Wang, G., Ujiie, H., Shibaki, A*., Nishie, W., Tateishi, Y., Kikuchi, K., Li, Q., McMillan, J. R., Morioka, H., Sawamura, D., Nakamura, H., and Shimizu, H*.: Blockade of autoantibody-initiated tissue damage by using recombinant Fab antibody fragments against pathogenic autoantigen. Am. J. Pathol. 176, 914-925 (2010).

61. Miyata, M., Sato, T., Mizuguchi, M., Nakamura, T., Ikemizu, S., Nabeshima, Y., Susuki, S., Suwa, Y., Morioka, H., Ando, Y., Suico, M. A., Shuto, T., Koga, T., Yamagata, Y., and Kai, H*.: The role of Glu54 residue in transthyretin stability and thyroxine binding. Biochemistry 49, 114-123 (2010).

62. Miyata, M., Sato, T., Kugimiya, M., Sho, M., Nakamura, T., Ikemizu, S., Chirifu, M., Mizuguchi, M., Nabeshima, Y., Suwa, Y., Morioka, H., Arimori T., Suico, M. A., Shuto, T., Sako, Y., Momohara, M., Koga, T., Morino-Koga, S., Yamagata, Y., and Kai, H*.: Crystal structure of green tea polyphenol(-)-epigallocatechin gallate (EGCG)-transthyretin complex reveals novel binding site distinct from thyroxine binding site. Biochemistry 49, 6104-6114 (2010).

63. Li, Q., Ujiie, H., Shibaki, A*., Wang, G., Moriuchi, R., Qiao, H.J., Morioka, H., Shinkuma, S., Natsuga, K., Long, H.A., Nishie, W., and Shimizu, H*.: Human IgG1 monoclonal antibody against human collagen 17 noncollagenous 16A domain induces Blisters via complement activation in experimental Bullous Pemphigoid model. J. Immunol. 185, 7746-7755 (2010).

64. Sakurai, S., Uchida, M., Kitano, K., Yamaguchi, H., Morioka, H., and Hakoshima T*.: Human flap endonuclease 1 sharply kinks and unpairs DNA to cleave the 5’-flap., submitted.

65. Mimono, A., Ishima, Y., Kragh-Hansen, U., Giam, V.C.T., Taguchi, K., Uchida, M., Watanabe, H., Maruyama, T., Morioka, H., and Otagiri, M*.: Phage display analysis confirms the importance of Lysines 199 and 195 in domain II of human serum albumin in the high affinity binding of 4Z, 15Z-bilirubin-IXα. , submitted.

II.総 説・著 書

1.西川諭,森岡弘志,池原森男:リボヌクレアーゼT1,蛋白質工学入門—新しい蛋白質をつくる—,崎山文夫編,pp. 146-164,秀潤社(1987).

2.Ikehara, M., Ohtsuka, E., Tokunaga, T., Nishikawa, S., Uesugi, S., Tanaka, T., Aoyama, Y., Kikyodani, S., Fujimoto, K., Yanase, K., Fuchimura, K., Kim, H. J., Ueda, Y., Kimura, T., and Morioka, H.: Synthesis and properties of ribonuclease T1 and its mutants. In Biophosphates and their analogues-synthesis, structure, metabolism and activity (Bruzik, K. S., and Stec, W. J., eds) pp.335-344 (1987).

3.森岡弘志,西川諭:RNase T1の蛋白工学,89先端科学技術開発年鑑,小関治男編,pp. 66-68(1989).

4.森岡弘志,西川諭,池原森男:リボヌクレアーゼT1,プロテインエンジニアリング,現代化学増刊19,三浦謹一郎編,pp. 3-12(1990).

5.大塚栄子,森岡弘志:変異タンパク質,人工タンパク質調製のための遺伝子の設計,調製,発現,新生化学実験講座1,タンパク質 VII.タンパク質工学,日本生化学会編,pp. 313-342,東京化学同人(1993).

6.大塚栄子,森岡弘志:DNAの合成,分子生物学プロトコール,小池克郎,関谷剛男,近藤寿人編,pp. 11-16,南江堂(1994).

7.森岡弘志:増殖細胞核抗原(PCNA)の構造と機能,生化学,第68巻,第9号,pp. 1542-1548(1996).

8.森岡弘志,大塚栄子:ランダム変異導入による抗体の作製,遺伝子医学,第2巻,第2号,pp. 310-313(1998).

9.森岡弘志,小林博幸,大塚栄子:紫外線損傷DNA認識抗体,生体物質相互作用のリアルタイム解析実験法−BIACOREを中心に,永田和宏・半田 宏編,pp. 138-146,シュプリンガーフェアラーク東京(1998).

10.森岡弘志:DNA複製因子PCNAの機能,道薬誌,第16巻,第6号,pp. 2-7(1999).

11.Morioka, H., Kobayashi, H., and Ohtsuka, E.: Anti UV-damaged DNA Antibodies. In Real-Time Analysis of Biomolecular Interactions - Applications of BIACORE (Nagata, K., and Handa H., eds) pp. 133-139, Springer-Verlag Tokyo (2000).

12.森岡弘志:単鎖可変域フラグメントとファージディスプレイ,タンパク質の分子設計,後藤祐児・谷澤克行編,pp. 184-196,共立出版(2001).

13.森岡弘志:表面プラズモン共鳴(SPR)テクノロジー,ファルマシア,第41巻,第2号,pp. 149-154(2005).

14.森岡弘志:組換え型モノクローナル抗体分子を利用するグリケーション後期反応生成物の   探索と構造解析,バイオとナノの融合 II,新生命科学の応用,北海道大学COE研究成果編集委員会編,第9章,pp. 133-145(2007).3/25

15.森岡弘志:低分子化合物を認識する蛍光融合タンパク質 薬学分析科学の最前線,日本薬学会物理系薬学部・分析化学担当教員会議編,第8章,pp. 144-145(2009).3/31

III.その他

1. Nishikawa, S., Morioka, H., Tokunaga, T., Aoyama, Y., Kikyodani, S., Fujimoto, K., Yanase, K., Tanaka, T., Uesugi, S., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Synthesis and expression of the native RNase T1 gene and several mutant genes. Nucleic Acids Symp. Ser. 16, 287-290 (1985).

2. Morioka, H., Nishikawa, S., Oda, Y., Yoshida, T., Orita, M., Adiwinata, J., Uesugi, S., Hakoshima, T., Tomita, K., Ohtsuka, E., and Ikehara, M.: Study on the functional role of arginine-77 in the phosphate binding region of RNase T1. Nucleic Acids Symp. Ser. 20, 11-12 (1988).

3. 森岡弘志:蛋白質工学によるリボヌクレアーゼT1の基質認識機構の研究,大阪大学(博士論文),(1989).

4. Morioka, H., Miura, H., Kamiya, H., Matsunaga, T., Nikaido, O., and Ohtsuka, E.: Cloning of VH and VL genes for antibodies specific for pyrimidine photo dimers. Nucleic Acids Symp. Ser. 30, 111-112 (1993).

5. Fujii, K., Morioka, H., and Ohtsuka, E.: Investigation of the optimal target site for phosphorothioate antisense oligonucleotides in human growth hormone mRNA. Nucleic Acids Symp. Ser. 31, 71-72 (1994).

6. Hashimoto, T., Morioka, H., and Izuta, S.: Binding activity of replication protein A to UV-damaged single-stranded DNA. Nucleic Acids Symp. Ser. 44, 177-178 (2000).

7. Ishikawa, Y., Higashi, E., and Morioka, H.: Molecular docking of porphyrins with cationic limbs on intramolecular G-quadruplex. Nucleic Acids Symp. Ser. 51, 247-248 (2007).

IV.招待講演

1. Inquiries into the Structure-Function Relationship of Proliferating Cell Nuclear Antigen, Eukaryotic DNA Replication Factor: Satellite Symposium, the 11th Annual Meeting of Japanese Section of International Society for Heart Research., Dec. 5 1994, Sapporo, JAPAN.

2. Structure and Function of Human PCNA: Analysis of Interaction with FEN-1 (flap endonuclease-1): 1st 3R (Replication, Recombination and Repair) Symposium, Oct. 13-16 1997, Miki, JAPAN.

3. Analysis of Molecular Recognition of Antibodies Apecific for UV-damaged DNA:   第21回日本光医学・光生物学会大会, Aug. 6-7 1999,金沢.

4. Preparation of a single chain Fv antibody against glycolaldehyde-derived AGE by phage display: CNU-KAIST-HANYANG UNVERSITY Joint Symposium, Developmental strategies on Bio-nano & Bio-ITechnology, May 25-26 2006, Hanyang University Ansan Campus, Ansan, Gyeonggi-do, KOREA.

5. 森岡弘志:低分子化合物に特異的な抗体の分子認識解析から機能性分子の作製研究まで,KIKUCHIバイオセミナー「三風会」,2008年 1/10,熊本.

 

●研究業績(学会発表)

2007年

1. Ishikawa, Y., Higashi, E., and Morioka, H.: Molecular docking of porphyrins with cationic limbs on intramolecular G-quadruplex.,第5回国際核酸化学シンポジウム(第34回核酸化学シンポジウム)Nucleic Acids Symp. Ser. 51, 247-248 (2007),11/20〜11/22

2.宮川健治,内田真希代,桜井 滋,箱嶋敏雄,森岡弘志:ヒトFEN1に存在するヒンジ領域によるヌクレアーゼ活性調節機構の解析,第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会・要旨集 1P-0719 p.288(横浜),2007年 12/11

2008年

1. 中村照也,内田真希代,森岡弘志,右田たい子,山縣ゆり子:EPRによるMutTの8-oxo-dGTP加水分解反応機構の研究,第11回生命化学研究会シンポジウム・熊本(2008)つくる生命化学 –未来への展望- P07 p.21(熊本),2008年 1/11

2.森岡弘志,内田真希代,宮川健治,増田 晃,坂田啓司,金城政孝,桜井 滋,箱嶋敏雄:ヒトFEN1のヌクレアーゼ活性促進機構の解析,平成20年度日本生化学会九州支部例会・シンポジウム S2-3,プログラム講演要旨集 p.28(博多),2008年 5/18

3.諏訪喜昭,中村照也,藤間祥子,池水信二,甲斐広文,森岡弘志,山縣ゆり子:Ets転写因子Est2による転写制御機構の構造学的解明,第8回日本蛋白質科学会年会,講演要旨集 3P-011 p.105(東京),2008年 6/12

4.蓑毛 藍,異島 優,内田真希代,丸山 徹,森岡弘志,小田切優樹:ファージディスプレイ法を用いた高ビリルビン親和性アルブミン変異体の探索と結合性評価,第21回バイオメディカル分析科学シンポジウム,講演要旨集 BB-8-01 p.63(札幌),2008年 8/8

5.森岡弘志:ダイオキシン誘導体を認識する組換え型抗体分子の調製と活性,生物化学的測定研究会第13回学術シンポジウム,講演要旨集 p.9 (博多),2008年 10/31

6.蓑毛 藍, 異島 優, 内田真希代, 丸山 徹, 森岡弘志, 小田切優樹:高ビリルビン結合親和性を有する組換えヒト血清アルブミン変異体のファージライブラリーの構築とそのスクリーニング,第23回日本薬物動態学会年会,講演要旨集 01D11-2 p.297(熊本),2008年 11/1

7.蓑毛 藍,異島 優,内田真希代,丸山 徹,森岡弘志,小田切優樹:新規血液浄化法の開発を目的としたファージディスプレイ法を用いた高ビリルビン親和性アルブミン変異体の探索,第25回日本薬学会九州支部大会 1B-13(延岡),2008年 12/6

8.櫻井 滋,北野 健,内田真希代,森岡弘志,箱嶋敏雄:ヒトFEN1によるDNA認識の構造学的基盤,第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会・要旨集 3P-0080 p.528(神戸),2008年 12/11

9.早乙女徹,薄木千里,内田真希代,片岡千和,澤田石一之,坂田啓司,金城政孝,諏訪喜昭,森岡弘志:ダイオキシン誘導体に特異的な一本鎖抗体と蛍光タンパク質との融合分子の大腸菌発現系による調製,第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会・要旨集 4P-0209 p.717(神戸),2008年 12/12

10.右田裕二,宮川健治,増田 晃,中尾杏輔,内田真希代,諏訪喜昭,坂田啓司,金城政孝,箱嶋敏雄,森岡弘志:ヒトPCNA変異体を用いるFEN1活性制御機構の解析,第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会・要旨集 4P-0223 p.718(神戸),2008年 12/12

2009年

1.蓑毛 藍,異島 優,内田真希代,丸山 徹,森岡弘志,小田切優樹:新規血液浄化法の開発を目的としたファージディスプレイ法を用いた高親和ビリルビン捕獲型アルブミン変異体の探索,日本薬学会第129年会 要旨集3 26J-am04 p.65(京都),2009年 3/26

2.右田裕二,宮川健治,増田 晃,中尾杏輔,内田真希代,諏訪喜昭,箱嶋敏雄,森岡弘志:ヒトPCNA変異体を用いるFEN1活性制御機構の解析,平成21年度日本生化学会九州支部例会・講演要旨集 B-10 p.53(福岡),2009年 5/16

3.右田裕二,宮川健治,増田 晃,中尾杏輔,内田真希代,諏訪喜昭,坂田啓司,金城政孝,箱嶋敏雄,森岡弘志:ヒトPCNA変異体を用いるFEN1活性制御機構の解析,第9回日本蛋白質科学会年会・要旨集 2P-084 p.104(熊本),2009年 5/21

4.蓑毛 藍,異島 優,諏訪喜昭,内田真希代,丸山 徹,森岡弘志,小田切優樹:ファージディスプレイ法によるアルブミン分子上のビリルビン結合部位の探索,第9回日本蛋白質科学会年会・要旨集 3P-021 p.124(熊本),2009年 5/22

5.早乙女徹,内田真希代,坂田啓司,金城政孝,諏訪喜昭,森岡弘志:(6-4)光産物に特異的な一本鎖抗体と蛍光タンパク質との融合分子の大腸菌発現系による調製,第9回日本蛋白質科学会年会・要旨集 3P-096 p.142(熊本),2009年 5/22

6.右田裕二,諏訪喜昭,内田真希代,宮川健治,増田 晃,中尾杏輔,箱嶋敏雄,森岡弘志:ヒトPCNA変異体を用いるFEN1活性制御機構の解析,第82回日本生化学会大会合同大会・プログラム集 3P-563 p.312(神戸),2009年 10/23

7.Saotome, T., Usuki, C., Yamagami, S., Uchida, M., Kataoka, C., Sawadaishi, K., Sakata, H., Kinjo, M., Suwa, Y., and Morioka, H., Preparation of single-chain Fv specific for dioxin derivatives fused with fluorescent protein by use of E.coli expression system, The 32nd Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan, Program 1P-0848 (Yokohama), Dec. 9 (2009).

8.Suwa, Y., Nakamura, T., Toma, S., Koga, T., Shuto, T., Ikemizu, S., Kai, H., Morioka, H., and Yamagata, Y., Structural basis of transcriptional regulation mechanisms by Ets transcription factor Ets2, The 32nd Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan, Program 3P-0226 (3W4-8) (Yokohama), Dec. 11 (2009).

9.Migita, Y., Suwa, Y., Uchida, M., Miyakawa, K., Masuda, A., Nakao, K., Sakata, H., Kinjo, M., Hakoshima, T., and Morioka, H., Analysis of the regulatory mechanisms of human FEN1 endonuclease activity by use of huamn PCNA mutants, The 32nd Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan, Program 4P-0163 (Yokohama), Dec. 12 (2009).

10.Minomo, A., Ishima, Y., Suwa, Y., Uchida, M., Maruyama, T., Morioka, H., and Otagiri, M., Identification of bilirubin binding site in human serum albumin via construction and bilirubin binding screening of a phage library, The 32nd Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan, Program 4P-0833 (Yokohama), Dec. 12 (2009).

11.早乙女徹,内田真希代,坂田啓司,金城政孝,諏訪喜昭,森岡弘志:ダイオキシン類に特異的な一本鎖抗体と蛍光タンパク質との融合分子の大腸菌発現系による調製,第26回日本薬学会九州支部大会・講演要旨集 1D-07 p.71(福岡),2009年 12/12

 

●外部資金導入状況

I.科学研究費補助金

研究代表者(森岡弘志)のみ、奨励研究は除く

(1)基盤研究(C),平成11年度〜12年度,

ヒトFEN1の増殖細胞核抗原(PCNA)とDNA複製・修復因子との相互作用,(代表),研究経費 計360万円

DNA複製・修復タンパク質,ヒトFEN1とヒトPCNAの直接の相互作用をそれぞれの部位特異的変異体を用いて,ヌクレアーゼ活性測定,Gel Mobility Shiftアッセイ,DNase I フットプリンティング等手法により解析した.FEN1のAsp21位の変異体が興味深い活性を持つと言う知見を得た.

(2)基盤研究(C),平成13年度〜14年度,

p120 RasGAPタンパク質のシグナル伝達制御機構の研究,(代表),研究経費 計360万円

細胞内シグナル伝達に関わるp120 RasGAPとp190 RhoGAPとの分子間相互作用を,タンパク質工学(ドメイン工学)的方法により作製した組換え型RasGAPタンパク質,および,リン酸化Tyr領域を含む合成RhoGAPペプチドを用いて,SPRバイオセンサー(Biacore)によりドメイン間相互作用を詳細に解析した.

(3)基盤研究(C),平成18年度〜19年度,

ヒトFEN1のPCNA結合部位近傍に位置するフレキシブルなヒンジ領域の機能解析,(代表),研究経費 計360万円

ヒトFEN1/PCNA複合体のX線結晶構造解析の結果より見出されたFEN1のヌクレアーゼドメインとPCNA結合領域の間に存在するヒンジ領域の機能解析を目的として,組換え型FEN1変異体を精製して,kinetics測定,Biacore等による分子間相互作用解析行い,新しい知見を得た.

II.科学研究費補助金以外の研究費

(1)文部科学省・研究拠点形成費補助金(21世紀COEプログラム,部局間・異分野間共同研究,プロジェクト研究費),平成14年度:

グリケーション後期反応生成物 (AGEs) と特異的一本鎖抗体との相互作用の解析,(代表),研究経費 計330万円

ファージディスプレイ法を利用して,新規AGE(GA-pyridine)をエピトープとするscFv抗体の作製とそのエピトープ構造の決定を行った.得られたscFv抗体の抗原結合活性をBiacore,および,蛍光相互相関分光法(FCCS)の2種の違った方法で詳細に解析した.

(2)科学技術振興機構・産学連携等研究費,平成14年度〜15年度:

肝ステム細胞を用いた高感度肝バイオセンサーの開発と代用肝組織の作製,(分担),研究経費 計600万円

肝ステム細胞(小型肝細胞)を用いた人工(代用)肝組織の作製を目指したプロジェクトに参加して,小型肝細胞特異的に存在する細胞表面抗原の探索とファージディスプレイ法による小型肝細胞の表面抗原に特異的な抗体の作製研究を行った.

(3)科学技術振興機構・産学連携等研究費,平成15年度〜17年度:

病原性変異蛋白質のウルトラハイスループット検査法の確立,(分担),研究経費 計250万円

BSE(牛海綿状脳症)の迅速な検査法の開発を目指したプロジェクトに参加して,正常プリオンタンパク質と異常プリオンタンパク質を識別する抗体の小型抗体化,これら小型抗体分子を蛍光タンパク質EGFPと融合させた組換え型タンパク質の作製を試みた.

(4)厚生労働科学研究費・政策創薬総合研究事業(財団法人ヒューマンサイエンス振興財団),平成20年度〜21年度:

クロイット・フェルト・ヤコブ病(CJD)特異的な,簡便かつ迅速髄液検査法の開発(分担),研究経費 計350万円

CJD迅速な検査法の開発を目指し,新規CJDマーカータンパク質を特異的に識別する抗体分子の作製,ならびに,これら抗体分子を蛍光タンパク質(GFP,YFP,CFP,BFP類)と融合させた組換え型タンパク質の作製をタンパク質工学的手法により進めている.

 

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